|
4-seminar mashg’ulot 4-mavzu: Gen injenerligi metodlarida ishlatiladigan fermentlar Reja: Restriksion endonukleazalar, restriktazalarning klassifikatsiyasi Sun’iy restriktazalar
|
| bet | 2/5 | | Sana | 15.01.2024 | | Hajmi | 490,22 Kb. | | #137517 |
Bog'liq 4-seminar mashg’ulotTasnifi Restrikt fermentlarining uchta asosiy turi (yoki sinflari) mavjud bo'lib, ularni aniqlash joylari nosimmetrik (palindromik) va assimetrik bo'li shi mumkin : 1.Birinchi turdagi cheklovlar (masalan, Escherichia coli K12 dan olingan EcoK) o'ziga xos nukleotidlar ketma-ketligini tan oladi va shu ketma-ketlik yaqinida ikki zanjirli DNK molekulasini ixtiyoriy nuqtada kesib tashlaydi va kesilgan joyning o'zi qat'iyan ataylab qilinmaydi (hosil bo'lgandan keyin DNK bilan kompleksning fermenti, DNKning uzoq mintaqasi bilan o'ziga xos ravishda o'zaro ta'sir qiladi yoki DNK zanjiri bo'ylab harakatlanadi). - Tasnifi Restrikt fermentlarining uchta asosiy turi (yoki sinflari) mavjud bo'lib, ularni aniqlash joylari nosimmetrik (palindromik) va assimetrik bo'li shi mumkin : 1.Birinchi turdagi cheklovlar (masalan, Escherichia coli K12 dan olingan EcoK) o'ziga xos nukleotidlar ketma-ketligini tan oladi va shu ketma-ketlik yaqinida ikki zanjirli DNK molekulasini ixtiyoriy nuqtada kesib tashlaydi va kesilgan joyning o'zi qat'iyan ataylab qilinmaydi (hosil bo'lgandan keyin DNK bilan kompleksning fermenti, DNKning uzoq mintaqasi bilan o'ziga xos ravishda o'zaro ta'sir qiladi yoki DNK zanjiri bo'ylab harakatlanadi).
2.Ikkinchi turdagi cheklash endonukleazalari (masalan, EcoRI, XbaI) ma'lum bir ketma-ketlikni tan oladi va DNK juft spiralini shu ketma-ketlik ichida aniq bir sobit nuqtada kesadi. Ushbu turdagi cheklash endonukleazalari markazy o'qga ega bo'lgan va simmetriya o'qining ikkala tomonida teng o'qiladigan palindromik sekanslarni taniydi. - 2.Ikkinchi turdagi cheklash endonukleazalari (masalan, EcoRI, XbaI) ma'lum bir ketma-ketlikni tan oladi va DNK juft spiralini shu ketma-ketlik ichida aniq bir sobit nuqtada kesadi. Ushbu turdagi cheklash endonukleazalari markazy o'qga ega bo'lgan va simmetriya o'qining ikkala tomonida teng o'qiladigan palindromik sekanslarni taniydi.
3.Uchinchi oraliq turdagi cheklash endonukleazalari (masalan, EcoPI) kerakli ketma-ketlikni taniydi va ikki qatorli DNK molekulasini kesib, ma'lum - 3.Uchinchi oraliq turdagi cheklash endonukleazalari (masalan, EcoPI) kerakli ketma-ketlikni taniydi va ikki qatorli DNK molekulasini kesib, ma'lum
miqdordagi nukleotid juftlarini uning uchidan (yoki tanib olish joyidan turli masofalardagi bir necha nuqtadan) chiqarib tashlaydi. Bunday holda, DNK fragmentlari to'g'ridan-to'g'ri (to'mtoq) uchlari bilan yoki chiqib ketgan (yopishqoq) 5'- yoki 3'-uchlari bilan hosil bo'ladi. Ushbu cheklash fermentlari assimetrik joylarni taniydi. Ushbu xususiyatlar turli xil in vitro DNKlarni yig'ish usullarida, masalan, Golden Gate assambleyasida keng qo'llaniladi. 2007-yilga kelib uch mingdan ortiq restriksion endonukleazalar ajratib olindi. Olti yuzdan ortiq restriktiv fermentlar savdo sifatida mavjud bo'lib, DNK modifikatsiyasi va gen injeneriyasi muammolari uchun laboratoriyalarda muntazam ravishda qo'llaniladi.
|
|
Bosh sahifa
Aloqalar
Bosh sahifa
4-seminar mashg’ulot 4-mavzu: Gen injenerligi metodlarida ishlatiladigan fermentlar Reja: Restriksion endonukleazalar, restriktazalarning klassifikatsiyasi Sun’iy restriktazalar
|
