|
Ish 3. O'SIMLAR EKSPLANTLARINI STERILIZASYoT QILISH USULLARI
|
| bet | 2/2 | | Sana | 04.01.2024 | | Hajmi | 17,53 Kb. | | #130142 |
Bog'liq методы стерилизацIsh 3. O'SIMLAR EKSPLANTLARINI STERILIZASYoT QILISH USULLARI
Ishning maqsadi: o'simlik materialini sterilizatsiya qilish usullari bilan tanishish, sterilizatsiya eritmalarining konsentratsiyasini va turli ekinlar urug'larini sterilizatsiya qilish vaqtini tanlash.
Tushuntirish. Kallus va o'simta madaniyati uchun eksplantlar olish , mikroklonal ko'paytirish va gormonal tartibga solishni o'rganish uchun steril ko'chatlar qo'llaniladi. Nihol uchun urug'lar suvga yoki ozuqaviy muhitga sepiladi.
Sterilizatsiya qilishdan oldin o'simlik ob'ektlari oqava suv bilan, ba'zan yuvish vositalari bilan yaxshilab yuviladi va ortiqcha to'qimalardan tozalanadi. Ildiz ekinlari va ildizlardan po'stlog'i olib tashlanadi, po'stlog'i kurtaklardan chiqariladi va kurtaklardan qoplama tarozilari chiqariladi.
O'simlik eksplantlari faol xlor (xloramin, Ca va Na gipoxlorit ), brom (bromli suv), vodorod peroksid , spirt, kumush nitrat, diatsid , antibiotiklar bo'lgan moddalar eritmalari bilan sterilizatsiya qilinadi .
Etil spirti ko'pincha u bilan materialning sirtini artib yoki materialni bir necha soniya davomida mutlaq spirtga botirib, oldindan sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi. Ba'zida bunday sterilizatsiya etarli bo'ladi, u mevalar, urug'lar, kurtaklar va tuxumdonlar bilan ishlashda qo'llaniladi.
Kaltsiy gipoxlorit (oqartirgich) 5-8 daqiqa davomida kurtaklar, tuxumdonlar, gullar, urug'lar va asirlarni davolash uchun 5-7% eritma shaklida qo'llaniladi.
eksplantlarni davolash uchun 0,5-5% eritma sifatida ishlatiladi . Ushbu modda hujayrali zahardir, shuning uchun sterilizatsiya vaqti va konsentratsiyasi eksperimental ravishda tanlanadi. Masalan : izolyatsiyalangan embrionlar uchun 10-15 daqiqa davomida 2-3% eritma, quruq urug'lar uchun esa 1 soat davomida 3-5% eritma ishlatiladi. Natriy gipoxlorit qoldiqlari avval 0,01 n HCl bilan chiqariladi va keyin avtoklavlangan distillangan suv bilan 8 marta yuviladi .
Reklama ostida
NOJO ʻYA _ TA ʼ SIRLARI MAVJUD . SHIFOKOR BILAN MASLAHATLASHING .
Xloramin 1-6% konsentratsiyada ishlatiladi. Anterlar va yosh embrionlar 1-3 daqiqa, quruq urug'lar - 30-60 daqiqa davomida davolanadi, keyin steril distillangan suv bilan 2-3 marta yuviladi.
Faol xlorni o'z ichiga olgan eritmalar bir marta ishlatiladi va ishdan oldin darhol tayyorlanadi.
Diatsid 0,2% li eritmada ildizlarni, urug'larni, bo'laklarni, to'qimalarni, apikal meristemalarni, izolyatsiya qilingan embrionlarni va anterlarni sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi. Diatsid 330 mg etanolmerkurik xlorid va 660 mg setilpiridinyum xloridni issiq suvda (330 ml) alohida eritib tayyorlanadi , keyin ularni aralashtiramiz va suyuqlik hajmini 1 litrga keltiramiz, bir necha tomchi Tween-80 yuvish vositasi qo'shamiz; Qorong'i joyda mahkam yopiq kolbada saqlang.
Antibiotiklar bakteriyalar bilan kasallangan o'simlik materialini sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi ( toj o't o'simtasi to'qimasi). Eng ko'p ishlatiladigan streptomitsin va tetramitsin 10-80 mg / l, ampitsillin 200-400 mg / l, levomisin , kanomisin va boshqalar.
Materiallar va uskunalar . Steril Petri idishlari, avtoklavlangan distillangan suv solingan kolbalar, sterilizatsiya eritmalari solingan kolbalar, bug'doy, javdar, tritikale, no'xat, loviya va boshqa ekinlar urug'lari, laminar quti, 96% etil spirti, paxta momig'i, spirt lampasi, pinset, filtr qog'ozi .
Taraqqiyot.
1. Bug'doy, javdar, tritikale, no'xat yoki boshqa ekinlarning 15-20 sog'lom donini tanlang.
2. Laminar qutiga urug'larni sterilizatsiya qiluvchi eritmalar (6% xloramin, 6% kaltsiy yoki natriy gipoxlorit, 96% spirt, 7% vodorod peroksid, suv) solingan Petri idishlariga soling. Sterilizatsiya vaqti eksperimental tarzda tanlanishi kerak.
3. Sterilizatsiya eritmalaridan urug'larni distillangan avtoklavlangan suv bilan yuving.
4. Nihol uchun urug'larni steril Petri idishlariga steril filtr qog'oziga oz miqdorda steril distillangan suvga soling. Petri idishlarini yoping va unib chiqish uchun ularni termostatga o'tkazing.
Laboratoriya hisobotiga qo'yiladigan talablar
Laboratoriya hujjatlari laboratoriya ishlarini bajarish tartibiga muvofiq, bosqichma-bosqich ehtiyotkorlik bilan yuritilishi kerak. Laboratoriya ishining mavzusi, maqsadi, zarur bo‘lgan materiallar va jihozlar, tajribalarning asosiy bosqichlari va natijalarini konspekt shaklida kiriting.
Tajriba natijalarini bir hafta ichida chizing. Sterilizatsiyalash eritmalarining samaradorligi haqida xulosalar chiqaring.
Nazorat savollari
1. Bepushtlik nima? Bepushtlikni buzish qanday oqibatlarga olib keladi?
2. Biotexnologiya laboratoriyasi binolari qanday sterilizatsiya qilinadi?
3. Idishlar va asboblar qanday sterilizatsiya qilinadi?
O'simlik ob'ektlari qanday sterilizatsiya qilinadi?
|
| |
