Oligonukleotidlarga yo'naltirilgan mutagenez (ODM)




Download 6,85 Mb.
Pdf ko'rish
bet33/114
Sana16.05.2024
Hajmi6,85 Mb.
#237857
1   ...   29   30   31   32   33   34   35   36   ...   114
Bog'liq
explanatory note new techniques agricu tcm30-512313

Oligonukleotidlarga yo'naltirilgan mutagenez (ODM)
Oligonukleotidlar genomdagi komplementar maqsadli ketma-ketlikka bog'lanadi
turli xil hujayralar uchun ( masalan, 3.2.1 ga qarang).
Oligonukleotidlar hujayralarga tegishli umumiy usullar bilan etkazilishi mumkin
komplementar bo'lmagan nukleotidlar. Hujayraning o'ziga xos DNK ta'mirlash tizimi
Machine Translated by Google


58
SAM Oliy darajadagi ilmiy maslahatchilar guruhi
2017 yil aprel
Qishloq xo'jaligi biotexnologiyasida yangi texnikalar
Tushuntirish eslatmasi
hujayrada degradatsiyaga uchraydi, lekin induktsiya qilingan mutatsiyalar barqaror meros bo'lib qoladi
Ikki chiziqli uzilishlar (DSB) deb ataladigan narsalarni ishlab chiqaradigan maqsadli saytlar. The
Buning maqsadi tasodifiy (SDN1) yoki bo'lmagan qo'shishni yoqishdir.
(Lusser, Parisi, Plan va Rodriguez-Cerezo, 2011).
Ushbu texnikaning o'ziga xos xususiyatlari tufayli (DNK kesilmaydi, uzunligi 20 dan 100 gacha bo'lgan katta
oligonükleotidlarga ehtiyoj va past
samaradorlik (maksimal 0,05%), maqsadsiz effektlar kutilmaydi. Biroq,
aniq joylarda tasodifiy (SDN2) mutatsiyalar yoki aniq joylarda (SDN3) katta segmentlarni (masalan, genlar)
kiritish imkonini beradi.
SDN texnikasining uchta qo'llanilishi tabiiy uyali aloqaga tayanadi
ODM uchun maqsaddan tashqari stavka haqida nashr etilgan ma'lumotlar topilmadi.
DNKdagi bunday kesiklarni tiklash mexanizmlari. SDN1 bo'lmaganlarga tayanadi.
ODM texnikasi tabiiy allelik o'zgarishlarni kiritishga hissa qo'shishi mumkin, ularni kesib o'tish orqali ham
olish mumkin, ammo qiyinroq va uzoqroq jarayonda. Biroq, saytga yo'naltirilgan nukleazlar va xususan
SDN2 (qarang
bu nomuvofiqliklarni tan oladi va ularni ketma-ketligidan foydalanib olib tashlaydi
homolog uchini birlashtirish (NHEJ) yo'li va homologiyaga yo'naltirilgan tuzatish (HDR) bo'yicha SDN2 va
SDN3. Bunday ta'mirlash mexanizmlari bo'lmasa, hujayralar qaytarib bo'lmaydigan shikastlanish yoki o'limga
duch kelishi mumkin.
DSB'lar HDR yoki NHEJ tomonidan ta'mirlanadi. Tabiatda HDR mexanizmi mavjud
DNK zanjirlaridan biri (oligonukleotid yoki komplementar maqsad).
genomda) ikkinchi ipni to'liq to'ldiruvchi bilan sintez qilish
quyida) bu maqsad uchun ko'proq moslashtirilgan va moslashuvchan ko'rinadi.

Download 6,85 Mb.
1   ...   29   30   31   32   33   34   35   36   ...   114




Download 6,85 Mb.
Pdf ko'rish

Bosh sahifa
Aloqalar

    Bosh sahifa



Oligonukleotidlarga yo'naltirilgan mutagenez (ODM)

Download 6,85 Mb.
Pdf ko'rish