|
Amaliy mashg’ulot materiallari mashg‘ulot№1 Mavzu: Farmatsevtik biotexnologiya va uning zamonaviy yo’nalishlari Mashg'ulot shakli
|
| bet | 30/74 | | Sana | 13.05.2024 | | Hajmi | 4,64 Mb. | | #230250 |
Bog'liq Amaliy mashg’ulot materiallari mashg‘ulot№1 Mavzu Farmatsevtik Faglar asosidagi vektorlar. Kosmidlar. Vas- va Yas- vektorlar. Bakteriya plazmidalarida o‘rtacha 7-8 m.j.n. uzunlikdagi fragmentlarni klonlash mumkin, eukariot genlari izchilligi esa (~10-25 m.j.n.) uzunroq bo‘ladi. Bundan tashqari genlarning kodirlovchi qismi atrofida joylashgan regulyator izchilliklarni o‘rganish uchun genomni kengroq klonlash zarur. Bunday katta fragmentlarni klonlash uchun bakteriofagi asosida tarkibiga 22 m.j..n. uzunlikdagi begona DNK fragmentlarini tutuvchi vektor konstruksiya yaratilgan. bakteriofag asosida klonlash uchun bunday vektorlarni yaratishda fag DNK molekulasining markaziy qismi fagning E.coli da ko‘payishi uchun zarur emasligi e’tiborga olingan xolda restriktazalar yordamida fag genomidan kesib olinganda replikatsiya uchun zarur bo‘lgan fagning o‘ng va chap elkasi o‘zgarmasdan qolishi kerak. Fag elkalari boshqa fragmentlardan alohida ajratilib, klonlash uchun vektor sifatida qo‘llaniladi. Kesilgan fag DNKsi o‘rniga o‘lchami 9-21 m.j.n. bo‘lgan begona DNK ulanadi. Bakteriyalarda faqat fagning ikkala elkasi va begona DNK tutuvchi faglar ko‘payadi. Bunda olingan fag rekombinant DNKsi 30 m.j.n. dan kam bo‘lmasligi kerak.
Laboratoriya ishi. 1-ish.
Nuklein kislotalarning pentoza bo’yicha Meyboum usuli bilan aniqlash.
Bu usul RNK tarkibiga kiradigan riboza va Arsen o’rtasidagi reaksiyaga asoslangan. RNK gidrolizi natijasida HCl ta’sirida ribozadan furfora hosil bo’ladi. Arsen bilan qizdirilganda yashil rang bo’ladi. Reaksiya yuqori sifatli emas, lekin eng yaqqol yashil rangni faqat riboza bilan hosil qiladi.
Reaktivlar: HCl (konsentrlangan) asosida tayyorlangan FeCl3 ning 0,1% li eritmasi. 2-eritma bevosita ishlashdan oldin tayyorlab, 1- eritma asosida tayyorlangan arsenning 0,5% li eritmasi. 1 ml da 0,1 mg RNK tutadi.
1-0,01/0,1
2-0,02/0,2
3-arsen solinadi. 0,5% Yashil rang hosil bo’ladi.
Dizoksiribozadan arsen 5% ko’k rang Ribozadan suv etkazadi. RNK, HClO4, Arsen RNK preparatlarning ma’lum miqdorini 0,5 N HClO4 eritma 15 min davomida qaynatiladi. Keyin sovitilib spektrofotometrda nur yutishini ko’riladi.
|
|
Bosh sahifa
Aloqalar
Bosh sahifa
Amaliy mashg’ulot materiallari mashg‘ulot№1 Mavzu: Farmatsevtik biotexnologiya va uning zamonaviy yo’nalishlari Mashg'ulot shakli
|
