|
Chortoq abu ali ibn sino nomidagi jamoat salomatligi tehnikumi 3-bosqich 31-guruh talabasi dadaxanova fotimaning fizioterapiya va
|
| bet | 6/8 | | Sana | 01.02.2024 | | Hajmi | 1,47 Mb. | | #150003 |
Bog'liq Elektroforez имя прилагательное 1000, Malumotlar bazasi, mustaqil ishimioz, Abdurashid kurs ishi pdf variant, eujem paper, 4-son 1. Tarix, falsafa, 1-Amaliy mashg’ulot. Pythonni o‘rnatish va ishga tushirish. O‘zg, 5 sinf nemis tilidan test, 3e-23 guruh ro\'yxati, HISOBOT MAKTAB, 9au, Эссе на тему, Choynak, № E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10 E11 E12 Mark-fayllar.org (1)Chiziqli molekulalarni ajratish
Turli xil agaroz konsentratsiyasiga ega jellar uchun chiziqli dsDNK molekulalarining normal ajralish diapazoni:
% agaroza
|
0.3
|
0,5
|
0,6
|
0,7
|
0,8
|
0,9
|
1.0
|
1.2
|
1.5
|
2.0
|
DNK hajmi [kbp]
|
5-60
|
1-30
|
1-20
|
0,8-12
|
0,6-10
|
0,5-8
|
0,5-7
|
0,4-6
|
0,2-3
|
0,1-2
|
Pastki chegara (asosan) jeldagi tasmaning tarqalishi bilan belgilanadi. Bular. agarozning past konsentratsiyasi bo'lgan jellarda kichik bo'laklar butunlay ajratiladi, lekin bantlar aniq emas.
Yuqori chegara kuchli ravishda forez amalga oshiriladigan maydon kuchiga bog'liq. Maydon kuchi qanchalik past bo'lsa, molekulalarni samarali ravishda uzoqroq ajratish mumkin.
O'ta o'ralgan va halqali molekulalarni ajratish
Afsuski, chiziqli va halqa molekulalarining nisbiy harakatchanligi forez shartlariga bog'liq: % jel, forez tezligi (xususan, bu halqa molekulalarining o'lchamini baholash uchun chiziqli markerdan foydalana olmasligingizni anglatadi).
Quyidagi jadval o'rtacha (~ 6V/sm) forez tezligida harakatchanlik nisbati haqida ba'zi fikrlarni beradi (qavslar ichida - tezroq tezlashtirish bilan):
Super jingalak o'lchami. DNK [kbp]
|
Turli % agaroz jeli uchun chiziqli DNK hajmi [kbp]
|
0,7%
|
1%
|
1,5%
|
2%
|
1
|
1.2
|
1.3
|
1,3(1,6)
|
1,5(1,0)
|
2
|
1.7
|
1.8
|
2 (2,4)
|
2,9(1,8)
|
3
|
2.2
|
2.3
|
2,7(3,7)
|
-
|
4
|
2.7
|
2.9
|
3,5(5,5)
|
-
|
5
|
3.2
|
3.5
|
5 (8,5)
|
-
|
6
|
3.9
|
4.2
|
8,5(>12)
|
-
|
7
|
4.4
|
5
|
>12
|
-
|
8
|
5.1
|
5.9
|
-
|
-
|
9
|
5.8
|
6.8
|
-
|
-
|
10
|
7
|
8.7
|
-
|
-
|
0,5 µg/ml EtBr mavjud bo‘lganda, buferning ion kuchi 4xTAE ga oshirilganda, bo‘shashgan va o‘ta o‘ralgan pDNKning ruxsati taxminan 20 barobar ortadi. Xuddi shu o'sishga EtBr kontsentratsiyasini kamaytirish orqali erishish mumkin.
Bir zanjirli DNK
1% agaroz forezida ssDNK bir xil o'lchamdagi dsDNKga qaraganda biroz tezroq (~ 10%) ishlaydi. ssDNK EtBr bilan ds dan sezilarli darajada zaifroq bo'yalgan (farq ~ 4-5 marta). Ya'ni, chiziqlar bir xil rang intensivligiga ega bo'lishi uchun ~5 marta ko'proq ssDNK olish kerak.
Zanjirlarni ajratish uchun siz forezdan oldin darhol ~1' 100oC qizdirishingiz yoki namunaga 0,1 M, 5-10' (NT yoki 37oC) NaOH qo'shishingiz kerak;
Gorizontal forez uchun maydon kuchini baholashda kameraning o'ziga xos geometriyasini e'tiborsiz qoldirish va elektrodlar orasidagi masofani to'g'ridan-to'g'ri o'lchash odatiy holdir.
Rasmda turli kuchlanishlarda forezning diagrammasi ko'rsatilgan. Forez turli vaqtlarda amalga oshirildi, shuning uchun 0,5 kb bo'lak bir xil masofani bosib o'tdi. Ko'rinib turibdiki, yuqori kuchlanishda forezni bajarish jel uzunligini qisqartirishga teng.
Yuqori sifatli yoki preparativ forez uchun tezligi va sifati o'rtasida oqilona kelishuv: ~2V / sm (ON forez uchun kamroq bo'lishi mumkin). Analitik forez uchun maqbul sifat ~ 6V/sm gacha saqlanadi.
DNK EtBr ni ayniqsa yuqori haroratlarda osonlikcha yo'qotadi (bu odatda forez yuqori kuchlanishda qo'llanilganda sodir bo'ladi).
Forez paytida EtBr (+) dan (-) gacha harakat qiladi. Agar siz jelni tark etmasligini istasangiz, uni forez tamponiga kiritish yaxshiroqdir.
|
|
Bosh sahifa
Aloqalar
Bosh sahifa
Chortoq abu ali ibn sino nomidagi jamoat salomatligi tehnikumi 3-bosqich 31-guruh talabasi dadaxanova fotimaning fizioterapiya va
|
