Eng oddiy holatda PCRni o'tkazish uchun quyidagi komponentlar talab qilinadi

Eng oddiy holatda PCRni o'tkazish uchun quyidagi komponentlar talab qilinadi:

• Eng oddiy holatda PCRni o'tkazish uchun quyidagi komponentlar talab qilinadi:
• DNKning amplifikatsiyaga kerak bo'lgan qismini o'z ichiga olgan DNK-matritsa.
• Istalgan DNK fragmentining turli iplarining qarama-qarshi uchlarini to'ldiruvchi ikkita praymer.
• Termostabil DNK polimeraza- DNKning polimerlanish reaksiyasini katalizlovchi fermentdir. PCRda foydalanish uchun polimeraza uzoq vaqt davomida yuqori haroratlarda faol qolishi kerak, shuning uchun termofillardan ajratilgan fermentlar qo'llaniladi - Thermus aquaticus (Taq polimeraza), Pyrococcus furiosus (Pfu polimeraza), Pyrococcus woesei (Pwo polimeraza) va boshqalar.
• Dezoksiribonukleozid trifosfatlar (dATP, dGTP, dCTP, dTTP).
• Polimeraza ishlashi uchun zarur bo'lgan Mg2+ ionlari.
• Kerakli reaksiya sharoitlarini ta'minlovchi bufer eritma - pH, eritmaning ion kuchi. Tuzlar, sigir zardobi albumini o'z ichiga oladi.

Mavjud namunada kerakli DNK ketma-ketligini aniq aniqlash va ko'paytirish uchun komplementar qisqa (18-30 nukleotid) fragmentlar - primerlarni yaratish uchun uning uchlaridagi nukleotidlar ketma-ketligini bilish kerak. Rasmda ketma-ketlikning ma'lum uchlari ko'k rang bilan belgilangan, qora esa kerakli DNK fragmentidir.

• Mavjud namunada kerakli DNK ketma-ketligini aniq aniqlash va ko'paytirish uchun komplementar qisqa (18-30 nukleotid) fragmentlar - primerlarni yaratish uchun uning uchlaridagi nukleotidlar ketma-ketligini bilish kerak. Rasmda ketma-ketlikning ma'lum uchlari ko'k rang bilan belgilangan, qora esa kerakli DNK fragmentidir.