• TO’RTINCHI BOSQICH- DETEKSIYA
    		•

    UCHINCHI BOSQICH- ELONGATSIYA




    Download 0,49 Mb.
    bet3/6
    Sana17.12.2023
    Hajmi0,49 Mb.
    #121581
    1   2   3   4   5   6
    Bog'liq
    PCR

    UCHINCHI BOSQICH- ELONGATSIYA

    • Polimeraza DNKning ikkinchi zanjirini yakunlay oladigan fermentdir. Buni boshlash uchun unga DNK allaqachon ikki ipli bo'lgan bo'lak kerak va bu erda DNK primer bilan o'zaro ta'sir qiladi. Polimeraza har doim zanjirni 5' dan 3' oxirigacha to'ldiradi (bu nomlar zanjirdagi dezoksiribozaning yo'nalishi bilan bog'liq; oddiy ikki zanjirli DNKda zanjirlar bir-biriga qarama-qarshi yo'naltirilgan: 5'_____________3 ' 3'_____________5'

    Ko'p ishlatiladigan polimerazalar Taq va Pfu 72 ° C da eng faoldir

    Endi eritmada juda uzun bo'lgan to'rtta DNK zanjiri mavjud. Ikkita - bo’lingan va ikkitasi primerlar yordamida qurilgan. Ammo jarayonni yana takrorlasangiz, quyidagi rasmni olasiz:


    Agar dastlabki DNK zanjirlarini har ikki yo'nalishda ham shartli cheksiz deb hisoblash mumkin bo'lsa, unda birinchi siklda olingan iplar bir yo'nalishda cheksiz bo'lib, ikkinchisida primer bilan chegaralanadi. Bunday zanjirlar ikkinchi primer bilan o'zaro ta'sirlashganda, har ikki tomondan cheklangan qismlar olinadi. Umuman olganda, PCRda bir necha o'nlab sikllar amalga oshiriladi, shuning uchun reaksiya mahsulotining mutlaq ko'pchiligi qisqa talab qilinadigan ketma-ketliklar bo'ladi, ular yordamida turli xil manipulyatsiyalarni amalga oshirish mumkin bo'ladi,

    TO’RTINCHI BOSQICH- DETEKSIYA

    • Boshida bizda oz miqdorda uzun, toʻliq uzunlikdagi hujayra DNK molekulalari boʻlgan eritma bor edi.
    • PCR oxirida bizda juda ko'p ko'paytirilgan kerakli bo'limlar, DNK bo'laklari bo'lgan eritma bo’ladi. Eritma jelga qo'llaniladi va jelga kuchlanish qo'llaniladi. Bir-ikki soat ichida DNK molekulalarining bo'laklari (ular zaryadga ega) jelda ularning massasiga proportsional masofaga siljiydi. Jel ultrabinafsha nurlar ostida joylashtiriladi va DNKning bir xil bo'laklari massasi jel to'plangan joyda yig’ilishni boshlaydi. Agar u yig'ilgan bo'lsa, unda DNKda primerga, kerakli "gen" ga mos keladigan bo'lim mavjud bo’ladi. Yorug’lik paydo bo’lmasa, aniq qismsiz bulutli chiziq, bu DNKning kerakli bo’limi yo'qligini anglatadi.

    Download 0,49 Mb.
    1   2   3   4   5   6




    Download 0,49 Mb.