• Fermentlardan analitik reagentlar
  • Biokimyo pmd




    Download 4,12 Mb.
    Pdf ko'rish
    bet76/273
    Sana21.05.2024
    Hajmi4,12 Mb.
    #249242
    1   ...   72   73   74   75   76   77   78   79   ...   273
    Bog'liq
    Sobirova-R.A-biokimyo

    Enzimoterapiya
    – fermentlardan kasalliklarni davolashda
    foydalanish:
    1. Oshqozon-ichak yo‘lida tegishli bezlardan fermentlar kam ishlab
    chiqarilganda (pepsin, pankreatin, festal, panzinorm).
    2. Turli yiringli-yallig‘lanish jarayonlarini davolashda: tripsin,
    ximotripsin va boshqalar.
    3. Qon va boshqa suyuqliklarda ferment yetishmaganligida ferment
    preparatlari yuboriladi.
    4. Tomirlardagi tromblarni eritish uchun (insult, infarkt miokardda)
    proteolitik fermentlardan foydalaniladi: fibrinolizin, brinaza, brinolaza
    (aktinomitsetlardan), streptokinaza va urokinaza.
    5. Zararli o‘simtalarni kompleks davolashda, masalan,
    asparaginazalimfoblast leykozlarni davolashda qo‘llaniladi (bu hujayralar
    asparaginning yetishmasligiga sezgirdirlar, chunki asparaginsintetaza
    fermentini saqlamaydilar). Poliaminooksidaza eksperimental o‘smalarni
    davolashda foydalaniladi (ular poliaminlarni oksidlovchi ferment
    saqlamaydilar, shu sababdan to‘planishi vujudga keladi).
    6. Ferment ingibitorlari o‘tkir pankreatit, artrit, allergik kasalliklarni
    davolashda qo‘llaniladi. Xolinesteraza, karboangidraza,
    monoaminooksidaza va proteolitik fermentlar ingibitorlaridan
    foydalaniladi.
    Fermentlardan analitik reagentlar
    sifatida laboratoriya tashxisida
    qo‘llaniladi. Klinik va biokimyoviy laboratoriyalarda organik moddalarni
    fermentativ usullar yordamida aniqlashdan muvaffaqiyat bilan
    foydalanilmoqda. Fermentlardan foydalanish qon, siydik, to‘qima va
    boshqa biologik materiallarda kam miqdordagi glyukoza, etanol,
    siydikchil, siydik kislotasi, aminokislotalar, lipidlar, xolesterin,
    nukleotidlar va boshqalarning miqdorini aniqlashga imkon beradi.
    Glyukoza va boshqa uglevodlarni fermentativ aniqlash usullari spetsifik
    fermentlardan foydalanishga asoslangandir. Glyukozani aniqlash uchun
    quyidagi fermentlardan foydalaniladi:
    a) glyukozoksidaza, glyukozani glyukon kislotasi va H
    2
    O

    gacha
    oksidlaydi;
    b) geksokinaza, ushbu reaksiyani katalizlaydi
    glyukoza+ATF 
    → 
    glyukoza-6-fosfat+ADF


    133
    d) glyukoza – 6 – fosfatdegidrogenaza glyukozani NAD yordamida
    glyukozolaktongacha oksidlaydi.
    Glyukozani biomateriallarda glyukozoksidaza yordamida aniqlash
    keng tarqalgan ferment usuli hisoblanadi. Glyukozaning miqdori haqida
    eritmada kislorod konsentratsiyasining kamayishi yoki hosil bo‘lgan
    H
    2
    O
    2
    miqdori bo‘yicha tahlil qilinadi.
    Etanolning miqdorini aniqlash alkogoloksidaza yoki
    alkogoldegidrogenazadan foydalanishga asoslangan. Alkogoloksidaza
    etanolning havo kislorodi bilan atsetaldegid va H
    2
    O

    gacha oksidlanishini
    katalizlaydi.

    Alkogol DG etanolni aldegid va NADH
    2
    gacha oksidlaydi.
    Keyingi yillarda etanolni aniqlashning fermentativ elektrod usuli
    yaratilgan.
    Siydikchilni aniqlash ureaza fermenti yordamida uning NH
    4
    +
    va CO
    2
    ga parchalanishiga asoslangan.

    Ureaza eritmalaridan anilizatorlarda
    foydalaniladi. Hosil bo‘lgan NH
    4

    ishqor ta’sirida gazsimon ammiakka
    aylanadi va u NH
    3
    ni sezuvchi elektrod yordamida aniqlanadi.
    Shuningdek, fermentli membran elektrodlardan ham foydalaniladi,
    ularda ureaza eritmasi dializ plenkalari orasiga joylashtiriladi.
    Siydikchilni aniqlash uchun ikki fermentli sistemadan ham
    foydalaniladi (ureaza-glutamatdegidrogenaza) va miqdoriy aniqlash
    spektrofotometrda NADH

    ni aniqlashga asoslangan. Siydik kislotani
    fermentativ aniqlash uning kislorod bilan allontoin va H
    2
    O

    gacha
    urikaza ishtirokida oksidlanishiga asoslangan. Teshikli shishaga
    immobillangan urikaza oqar mikroreaktorlarda ishlatiladi.
    Aminokislotalarni aniqlash L-aminooksidaza fermentlaridan
    foydalanishga asoslangan. Ular aminokislotalarni havo kislorodi
    yordamida ketokislota, H
    2
    O
    2.
    va NH
    3
    gacha oksidlaydi. Bu jarayon
    elektrokimyoviy usulda aniqlanadi. Hozirgi vaqtda laktat, piruvat, 3 –
    oksibutiratlarni NADH

    konsentratsiyasining o‘zgarishiga qarab
    spektrofotometrik yoki elektrokimyoviy aniqlash usuli ishlab chiqilgan.
    Glitserinni aniqlash uchun glitserinkinaza, glitserin-3-
    fosfatdegidrogenaza usullari qo‘llaniladi. Lipid va fosfolipidlarni
    topishda birinchi bosqichda spetsifik lipaza va fosfolipaza
    fermentlaridan foydalaniladi. Xolinfosfatidlarni spetsifik tahlil usuli
    xolinoksidaza fermentini qo‘llashga asoslangan. Uning yordamida xolin
    betain va H
    2
    O

    ga parchalanadi. Vodorod peroksidi peroksidaza usuli
    bilan topiladi. Xolesterinni fermentativ aniqlash usullari
    xolesterinoksidazadan foydalanishga asoslangan, u xolesterinni xolestan
    – 4 – ona – 3 va H
    2
    O
    2
    gacha oksidlaydi. Oxirgi mahsulot polyarografik,


    spektrofotometrik, fluorimetrik, xemilyuminessent usulida aniqlanadi.
    Fermentlar bilan xolesterin aniqlaganda usulning sezuvchanligi va
    spetsifikligini oshiradi, shuningdek tekshiruv o‘tkazishni
    soddalashtiradi. Spesifik degidrogenaza va diaforaza qon plazmasida
    1mkMgacha o‘t kislotalarini fluorimetrik indikatsiya qilishga imkon
    beradi.
    Ferment usullari NAD, NADF, FMN va ATF miqdorini topishga
    imkon beradi. NAD miqdorini aniqlash uchun LDG fermenti
    qo‘llaniladi. Bakterial ferment lyutsiferaza NAD, FMN, ATF miqdorini
    aniqlash uchun foydalaniladi. Guaninnukleotidlarni fermentativ tahlili
    spetsifik nukleotidkinazalar yordamida o‘tkaziladi, oxirgi mahsulot
    NADF yoki ATF miqdori aniqlanadi.


    VI BOB

    Download 4,12 Mb.
    1   ...   72   73   74   75   76   77   78   79   ...   273




    Download 4,12 Mb.
    Pdf ko'rish