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Dienstag, 30.05.2017 u. Mi. 31.05.2017

Molekularbiologische Methoden in der Virologie:
EINLEITUNG
In diesem Praktikumsteil sollen an zwei Kurstagen grundlegende molekularbiologische Methoden gelehrt werden, die in der diagnostischen Virologie täglich eingesetzt werden.
Basale Labormethoden wie Polymerasekettenreaktion (Polymerase Chain Reaction, PCR), Nukleinsäure Sequenzierung und Echtzeit (Real time) PCR, sowie Sequenzanalysen sollen anhand von Beispielen aus der Labordiagnostik des Hepatitis C Virus (HCV) erläutert werden.
Am ersten molekularbiologischen Kurstag werden sie eine „herkömmliche“ nicht quantitative PCR ansetzen, womit der Qualitative Nachweis von HCV RNA gelingen kann sowie HCV-Genombereiche für Sequenzanalysen amplifiziert werden. Die Auswertung dieser PCR wird am zweiten Kurstag durchgeführt, weil einzelne Arbeitsschritte länger als ein Kurstag dauert. Außerdem werden Sie eine Real-Time Reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion ansetzen, welche neben dem qualitativen Nachweis von Virusgenom auch für die Quantifizierung von Viren zum Beispiel im Serum benutzt werden kann.


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