• Methode: One-Step RT-PCR
  • Virologie sommersemester 2017 Vorbemerkungen Wegen der nur begrenzt verfügbaren Zeit können im Rahmen dieses Praktikums nur einige der in der virologischen Labordiagnostik üblichen Untersuchungsverfahren




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    Software

    Quelle/ Link

    Oligo Properties Calculator

    http://www.basic.northwestern.edu/biotools/oligocalc.html

    BLASTn

    http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/



    Methode: One-Step RT-PCR

    Wir benutzen eine Methode die aufgrund der besonderen Primer alle bekannten HCV Genotypen amplifizieren kann. Durch das Sequenzieren der PCR Produkte kann man schließlich Aussagen über den Genotyp einer positiven Probe machen.


    Die angewendete PCR (One-Step RT-PCR) ist eine modifizierte Form der PCR, da HCV als RNA Virus erst in DNA umgeschrieben werden muss, um in der PCR amplifiziert werden zu können. Hierfür benutzt man ein zweites Enzym: Reverse Transkriptase (RT). Man nennt das gemeinsame Durchführen in einem Reaktionsgefäß von RT und PCR auch One-Step RT-PCR.
    VERSUCH :


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