One-Step RT-PCR zum Nachweis und Genotypsierung von HCV-RNA




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Sana02.06.2021
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One-Step RT-PCR zum Nachweis und Genotypsierung von HCV-RNA
Alle Schritte sind mit Handschuhen durchzuführen! Dies ist wichtig, um Kontamination der Proben zu vermeiden (falsch-positive Ergebnisse) und die virale RNA vor dem Abbau durch ubiquitäre RNAsen zu schützen (falsch-negative Ergebnisse). RNAsen befinden sich u.a. auf der menschlichen Haut, Schweiß, Haaren usw.
Die Durchführung der PCR erfolgt in 50 µl-Ansätzen. Dazu wird zunächst ein Mastermix erstellt, der alle Komponenten enthält (siehe Pipettierschema). Nach dem Vorlegen der aufgereinigten RNA/DNA aus der Patientenprobe wird der Mastermix zu den Ansätzen hinzupipettiert.

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