• Detektions-Antikörper
  • Virologie sommersemester 2017 Vorbemerkungen Wegen der nur begrenzt verfügbaren Zeit können im Rahmen dieses Praktikums nur einige der in der virologischen Labordiagnostik üblichen Untersuchungsverfahren




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    Sana02.06.2021
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    Arbeitsmaterialien: An jedem Arbeitsplatz mit einer geraden Nummer befinden sich 4 verschiedene Reagenzien, und ein Blot-Streifen für die Durchführung des HCV-Immunoblots. Außerdem finden Sie auf jeder Arbeitsbank 1 Pinzette, mehrere Plastikpipetten (1 oder 2 ml) und mehrere Lagen Zellstoff.

    1. Detektions-Antikörper: Dabei handelt es sich um eine Lösung, die anti-human Antikörper enthält. Dieser Antikörper ist mit dem Enzym „Alkalische Phosphatase“ (AP) gekoppelt. Etwas mehr als 1 ml dieser Lösung befindet sich in einem 2 ml Reaktionsgefäß, welches mit „Ak“ beschriftet ist.

    2. Waschpuffer: Ungefähr 5 ml TBS-T Puffer befinden sich in einem 15 ml Gefäß, das mit „TBS“ beschriftet ist.

    3. Substrat: Die Substratlösung enthält (BCIP/NBT). Die ursprünglich farblose Substratlösung wird durch die Alkalische Phosphatase gespalten. Eines der Spaltprodukte, das nun eine dunkle violette Farbe annimmt verbleibt an der AP. Etwas mehr als 1 ml dieser Lösung befindet sich in einem 2 ml Reaktionsgefäß, welches mit „Sub“ beschriftet ist.

    4. Stopp-Lösung: Die Lösung enthält 0,1M Schwefelsäure, welche jegliche Aktivität der AP beendet. Etwas mehr als 1 ml dieser Lösung befindet sich in einem 2 ml Reaktionsgefäß, welches mit „Stop“ beschriftet ist.




    1. Prozedere:

      1. In jeder Reihe à 6 Studenten befindet sich eine Schale mit 3 bzw. 4 länglichen Vertiefungen. Legen Sie ihren Blot-Streifen mit der Pinzette in eine Vertiefung der Schale, die Markierung auf dem Streifen („O“, „X“ oder „-„) soll sich dabei am oberen Ende der entsprechend markierten Vertiefung befinden.


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