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Kurzzeit-Kultur (Shell Vial Assay) zur fluoreszenzmikroskopischen Früherkennung therapierelevanter Virus-Infektionen: Theorie und Demonstration
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| bet | 13/23 | | Sana | 02.06.2021 | | Hajmi | 2,1 Mb. | | #14718 |
Kurzzeit-Kultur (Shell Vial Assay) zur fluoreszenzmikroskopischen Früherkennung therapierelevanter Virus-Infektionen: Theorie und Demonstration
Bei manchen Virusarten (beispielsweise Cytomegalovirus) kann ein klassischer Virusisolierungsversuch auf Zellkulturen u.U. einige Wochen dauern. Bei klinischem Verdacht auf eine erregerbedingte Erkrankung ist jedoch häufig eine rasche labormedizinische Erreger-Identifizierung unabdingbar. Durch Kombination von klassischer auf Zellbiologie basierender und immunchemischer Technologie ist es möglich, auch extrem langsam replizierende Viren innerhalb von Stunden zu detektieren.
Eine Kurzzeit-Kultur (der sog. Shell Vial Assay) wird in der virologischen Labordiagnostik in der folgenden Weise durchgeführt:
Empfängliche Zellen werden auf Deckgläschen angezüchtet und mit dem verdächtigen Untersuchungsmaterial beimpft. Etwa vorhandene infektionstüchtige Viren dringen in jeweils eine einzelne der ca. 100.000 Zellen ein und bewirken bereits unmittelbar danach die Expression virus-codierter Nicht-Struktur-Proteine mit meist regulatorischer Funktion für den Replikationsvorgang. Mittels spezifischer, fluoreszenzmarkierter Antikörper (meist monoklonal) werden die von Virus befallenen Zellen unter dem Fluoreszenzmikroskop sichtbar.
Eine Abwandlung der hier beschriebenen Technologie ist der CMV-pp65-Antigen-Nachweis: Aus ungerinnbar gemachtem Blut werden mittels Dichtegradienten Leukozyten präpariert, angereichert, auf Objektträgern ausgestrichen und fixiert. Mit spezifischem Antikörper wird fluoreszenzmikroskopisch die Ablagerung von CMV-spezifischem Protein in den Blutzellen des Patienten detektiert.
Diese Untersuchungsverfahren sind von großer Bedeutung bei der Betreuung von Immungeschwächten (v.a. Transplantat-Empfänger, HIV-Infizierte).
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Bosh sahifa
Aloqalar
Bosh sahifa
Kurzzeit-Kultur (Shell Vial Assay) zur fluoreszenzmikroskopischen Früherkennung therapierelevanter Virus-Infektionen: Theorie und Demonstration
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