• Elektroforez usuli
  • Oqsil strukturasini o‘rganish usullari
  • Biokimyo pmd




    Download 4,12 Mb.
    Pdf ko'rish
    bet19/273
    Sana21.05.2024
    Hajmi4,12 Mb.
    #249242
    1   ...   15   16   17   18   19   20   21   22   ...   273
    Bog'liq
    Sobirova-R.A-biokimyo

    e) Afin xromatografiya.
    Bu xromatografiya usulli quyidagi prinsiplarga asoslangan bo‘ladi:
    ajratib olinishi lozim bo‘lgan oqsilga spetsifik bo‘lgan modda Z-
    ligandda erimaydigan M moddasiga mustahkam qilib biriktiriladi.
    Shunday qilib, tayyorlangan MZ-adsorbenti xromatografiya kolonkasiga
    solinadi va u orqali oqsil aralashmasi o‘tkaziladi. Bunda P oqsili spetsifik
    adsorbent bilan birikadi. MZ+P=MZP. So‘ngra kolonka yaxshilab
    yuviladi va birikkan P-oqsilining birikmasini dissotsiatsiya qiluvchi
    eritma bilan ajratib kolonkadan chiqariladi.
    Elektroforez usuli
    Bu usul bo‘yicha oqsillar elektr maydonida har xil harakatlanish
    tezligiga asoslanib fraksiyalarga bo‘linadi. Filtr qog‘ozida o‘tkaziladigan
    elektroforez usuli yordamida inson qon zardobidagi oqsillarni 6


    34
    fraksiyaga ajratish mumkin. Qog‘ozda o‘tkaziladigan elektroforezdan
    tashqari hozirgi vaqtda kraxmal geli, poliakrilamid va sellyulozada
    oqsillarni elektroforez yordamida fraksiyalarga bo‘lish va ajratish
    mumkin.
    Filtr qog‘ozi o‘rniga yuqorida ko‘rsatilgan moddalar elektroforezda
    ishlatilganda qon zardobi oqsillarini ko‘proq fraksiyalarga ajratish
    mumkin. Masalan: kraxmal gelida 10 ta, poliakrilamid gelida 18 ta oqsil
    fraksiyalarini olish mumkin. Elektroforez yordamida ajratilgan oqsilni
    aniqlash uchun qog‘oz va gellar bromfenol yoki 10 V amid qora bo‘yog‘i
    bilan va boshqa oqsil bilan rang beruvchi reaktivlar bilan ishlanadi.
    Oqsil strukturasini o‘rganish usullari
    Oqsillarni gomogen holda ajratib olish ularning birlamchi,
    ikkilamchi, uchlamchi va to‘rtlamchi strukturasini o‘rganishga
    imkoniyat tug‘diradi. Oqsilning aminokislota tarkibini aniqlash uchun
    oqsil to‘la aminokislotalargacha gidroliz qilinadi va analizatorlar
    yordamida aminokislotalar tekshiriladi.
    Oqsilning ikkilamchi strukturasini esa izotop almashinish usuli,
    ultrabinafsha va infraqizil spektrosko‘p usullari yordamida aniqlanadi.
    Bu usullar polipeptid zanjirni spirallanish darajasini aniqlashga
    imkoniyat beradi. Oqsilning uchlamchi va to‘rtlamchi strukturasi –
    elektron mikrosko‘p va rengenostruktur tahlil yordamida aniqlanadi.

    Download 4,12 Mb.
    1   ...   15   16   17   18   19   20   21   22   ...   273




    Download 4,12 Mb.
    Pdf ko'rish