• Nukleazalar
  • Restriktazalar.
  • Farmatsevtik biotexnologiya




    Download 4,16 Mb.
    Pdf ko'rish
    bet77/134
    Sana07.06.2024
    Hajmi4,16 Mb.
    #261246
    1   ...   73   74   75   76   77   78   79   80   ...   134
    Bog'liq
    biotex

    DNK ligaza
    qo‘shni nukleotidlar orasidagi fosfodiefir bog‘larini tiklash orqali DNK 
    bo‘laklarini bog‘lash kabi bitta asosiy vazifani bajaradi. Bu jarayon ligirlash deb ataladi. Gen 
    muhandisligida ko‘pincha ligirlash uchun T4 fagining DNK-ligazasidan foydalaniladi. T4 ligaza 
    yordamida DNK ning har qanday bo‘lagi “yopishqoq uchli” yoki “to‘mtoq uchli” qismlari 
    biriktiriladi. Bu eng ko‘p qo‘llaniladigan fermentlardan biridir.
    Nukleazalar 
    - nuklein kislotlar molekulalari gidrolizi reaksiyalarini katalizlovchi 
    fermentlarning yirik guruhi. DNK yoki RNK molekulalari nukleazalar ta’sirida bo‘laklarga yoki 
    alohida nukleotidlarga parchalanib ketadi. Nukleazalarning hujayradagi dastlabki vazifasi – 
    hayotiy jarayonning ayni vaqti uchun keraksiz bo‘lgan molekulalari (masalan, mRNK ni 
    translyasiyadan so‘ng) degradatsiyasini va nuklein kislotlarni begona molekulalardan himoya 
    qilish (bakteriya fag bilan zararlanganda fag DNK sini bakteriya nukleazalari tomonidan 
    parchalab yuborilishi) dan iborat.
    Restriktazalar.
    Gen muhandisligida foydaliligi nuqtai nazaridan maxsus endonukleazalar 
    alohida guruhni tashkil etadi.
    Genlar ustida bevosita muolajalar o‘tkazish usullarining takomillashtirilishi restriksion 
    endonukleazalar (restriktazalar)ning ochilishi bilan bog‘liqdir. 1953 yildayoq E.colining alohida 
    shtammi DNK si boshqa shtammi hujayrasi (masalan, V shtammi DNKsi S shtammi hujayrasi) 


    88 
    ga kiritilganda, odatda, genetik faollik ko‘rsata olmaydi. CHunki u maxsus fermentlar-
    restriktazalar bilan tezda bo‘laklarga bo‘lib yuboriladi. Hozirgi vaqtda turli xil 
    mikroorganizmlardan mingdan ortiq har xil restriktazalar ajratib olingan. Gen muhandisligida 
    200dan ortiq turi keng qo‘llanilmoqda. 
    Restriktazalar endonukleazalarning DNKni muayyan maxsus ketma-ketliklari 
    restriksiya 
    saytlari
    (nuqtalari)ni hosil qilib gidroliz qiladigan guruhi hisoblanadi. Har bir restriktaza 
    o‘zining restriksiya saytini taniydi va DNKni restriksiya sayti izchilliklari ichidan yoki uning 
    atrofidan boshlab qirqadi. SHunday qilib, muayyan bir restriktaza ta’sirida bitta va aynan o‘sha 
    DNK ketma-ketligi har doim ham bir xildagi bo‘laklar yig‘indisini hosil qiladi. Restriktazalarni 
    nomlashda ferment ajratib olingan bakteriya turining lotincha nomini bosh harflari va 
    qo‘shimcha belgilaridan foydalaniladi. CHunki bir turdagi bakteriyalardan bir necha xil 
    restriktazalar ajratib olingan bo‘lishi mumkin. Essherichia coli-EcoR I, EcoR V, Haemophilus 
    influenzae –Hinf I, Streptomyces albus – Sal I, Thermus aquaticus – Taq I. Basillus 
    ameloliguefaciens H 
    Restriktazalar nukleotid ketma-ketliklarini qirqishiga ko‘ra, bir necha tipga bo‘linadi. I-
    tipdagi restriktazalar restriksiya saytlarini taniydi, lekin tanib olgan saytdan ixtiyoriy masofada 
    (bir necha o‘ndan to bir necha yuz ming nukleotid juftlarga qadar) qirqadi. Bunday 
    restriktazalarni gen muhandisligi muammolarini hal etishda qo‘llab bo‘lmaydi. III-tipdagi 
    restriktazalar ham I-tipdagi restriktazalarga o‘xshaydi, ular DNKni tanib olingan saytdan 20-35 
    n.j. masofada gidroliz qiladi, shuning uchun ham amaliy maqsadlarda kam foydalaniladi. 
    Rekombinant molekulalar olish uchun asosan II-tipdagi restriktazalar qo‘llaniladi. Bunday 
    restriktazalarning asosiy tavsifi shundaki, ularning tanish sayti va qirqish joyi bir-biriga mos 
    keladi. 

    Download 4,16 Mb.
    1   ...   73   74   75   76   77   78   79   80   ...   134




    Download 4,16 Mb.
    Pdf ko'rish